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利用Plantarray高通量植物生理表型平臺(tái)研究干旱脅迫下的辣椒植株

更新時(shí)間:2022-05-13 點(diǎn)擊量:1124

在非生物脅迫下提高作物生產(chǎn)力是農(nóng)業(yè)科學(xué)界面臨的最大挑戰(zhàn)之一。盡管進(jìn)行了廣泛的研究,但對(duì)非生物抗逆作物商業(yè)轉(zhuǎn)移率的研究產(chǎn)出很低。這主要是由于基因型×環(huán)境相互作用的復(fù)雜性,特別是能夠量化植物對(duì)動(dòng)態(tài)環(huán)境的動(dòng)態(tài)生理反應(yīng)能力。大多數(shù)現(xiàn)有的表型分析設(shè)備使用機(jī)器人和自動(dòng)圖像采集和分析來收集信息。然而,它們直接測(cè)量整株植物生理特性的能力是有限的。我們展示了一種高通量功能表型系統(tǒng) (HFPS),該系統(tǒng)能夠比較植物在動(dòng)態(tài)環(huán)境中對(duì)不同環(huán)境條件的動(dòng)態(tài)響應(yīng),因?yàn)樗梢灾苯雍屯瑫r(shí)測(cè)量幾種處理下與植物的產(chǎn)量相關(guān)生理性狀。該系統(tǒng)被設(shè)計(jì)為一對(duì)一 (1:1) 的植物單元[傳感器+控制器],即每個(gè)單獨(dú)的植株都有自己的個(gè)性化傳感器、控制器和灌溉閥,能夠(i)以高時(shí)空分辨率監(jiān)測(cè)每株植物的水關(guān)系動(dòng)力學(xué)——以及植株整個(gè)生命周期內(nèi)的環(huán)境響應(yīng),(ii)由于每株植物的多個(gè)獨(dú)立處理方案,采用了真正的隨機(jī)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),以及(iii)由于植物或其他物體的靜止性而減少人為環(huán)境干擾。此外,我們提出了兩個(gè)新的彈性量化相關(guān)性狀,也可以使用 HFPS 進(jìn)行表型分析:蒸騰恢復(fù)率和夜間水分重吸收。我們使用HFPS篩選了兩種商業(yè)生物刺激劑(海藻提取物-ICL-SW和代謝物配方-ICL-NewFo1)在不同灌溉制度下對(duì)辣椒生長(zhǎng)的影響。生物刺激劑被認(rèn)為是提高作物生產(chǎn)力的一種替代方法。然而,它們復(fù)雜的作用模式需要具有成本效益的田間表型鑒定。兩種處理方式(生物刺激劑和干旱)的組合使我們能夠評(píng)估系統(tǒng)在研究生物刺激劑對(duì)耐旱性影響方面的精度和分辨率。我們分析和討論植物在不同階段的行為特征,并評(píng)估生產(chǎn)力和恢復(fù)力之間的懲罰和權(quán)衡。在這個(gè)測(cè)試案例中,我們提出了一個(gè)篩選生物刺激劑生理作用機(jī)制的方案。

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圖1.實(shí)驗(yàn)裝置

(A) 隨機(jī)實(shí)驗(yàn)裝置陣列視圖,由 72 個(gè)裝有辣椒植株的測(cè)量單元組成。

(B) 系統(tǒng)框圖。實(shí)心圓圈 - 灌溉良好的植株;空心圓圈 - 干旱恢復(fù)條件下的植株。綠色 - ICL-SW 處理過的植株,橙色 - ICL NewFo1 處理過的植株,藍(lán)色 - 對(duì)照(無生物刺激劑)植株。所有盆栽表面都被覆蓋以減少蒸發(fā),灌溉通過多出口滴頭注入土壤,以確保灌溉施肥和生物刺激素的均勻分布。

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圖2.在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中,大氣條件和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度以系統(tǒng)相對(duì)重量表示

采用隨機(jī)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),定量比較兩種生物刺激劑(海藻提取物ICL-SW和代謝物配方ICL-NewFo1)對(duì)植物關(guān)鍵生理特性的影響。在兩種灌溉條件下下,比較了兩種生物刺激劑與對(duì)照(無生物刺激劑)的效果:(i)灌溉良好,和(ii)干旱脅迫,從灌溉良好時(shí)期開始,然后是控制干旱期和連續(xù)恢復(fù)期(圖2B)。

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圖3.生物刺激劑對(duì)植物蒸騰作用的影響

在良好灌溉期間,所有六組的日蒸騰量均逐漸增加(圖3A)。而在實(shí)驗(yàn)第13天開始的干旱處理期間,植株的日蒸騰量和VWC逐漸減少(圖3A、B)。在實(shí)驗(yàn)第31天(恢復(fù)期)恢復(fù)灌溉后,日蒸騰量和VWC快速增加(圖3A、B)。干旱臨界值(定義為開始限制蒸騰速率的土壤VWC值 [臨界VWC,(θc)])是為遭受干旱的植物確定的(圖3C)。對(duì)照組和兩種生物刺激劑處理VWC值為θc = 0.15,但由于ICL SW處理的植物與其他兩組相比VWC下降的模式不同(圖3B),二者在不同的時(shí)間達(dá)到了θc,對(duì)照和ICL-NewFo1處理的植株在第22.5天達(dá)到θc,ICL-SW處理植物在第21天達(dá)到θc(圖3B、C)。在第27-29天干旱對(duì)處理和未處理植株每日蒸騰速率模式的影響(相對(duì)于三個(gè)充分灌溉組的蒸騰速率模式)如圖3D所示,這表明ICL SW處理的植株在干旱條件下午間(1200至1400小時(shí))的蒸騰速率顯著降低,但在充分灌溉條件下達(dá)到了明顯較高的蒸騰速率(圖3E)。在充足的灌溉條件下,ICL-NewFo1處理的植株蒸騰速率介于對(duì)照和ICL-SW處理之間,并且在干旱條件下蒸騰速率也有類似的降低(圖3E)。

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圖4.在整個(gè)試驗(yàn)期間,平均值±SE計(jì)算的整株重量

通過使用所有六組在整個(gè)試驗(yàn)期間(36天)計(jì)算的植物重量,將蒸騰作用標(biāo)準(zhǔn)化為生物量(圖4A)。六個(gè)組在充分灌溉期間的植株增重率相似,并且三個(gè)干旱脅迫組在干旱期間下降。在恢復(fù)期,后兩組的重量增加率再次開始增加(圖4A)。然而在試驗(yàn)結(jié)束時(shí),ICL SW處理的植株在后一階段的增重率較高,導(dǎo)致干枝生物量顯著高于對(duì)照,這可能是由于這種趨勢(shì)的累積效應(yīng)(圖4B)。對(duì)于灌溉良好和缺水的植物,地上部分的干生物量與累積日蒸騰量(即與干重相關(guān)的WUE)之間的相關(guān)性相對(duì)較高(R2>0.8)(圖4C)。盡管ICL SW處理的植株蒸騰速率較高,但其蒸騰作用歸一化為植株重量E(圖4D),與對(duì)照在充分灌溉條件下的蒸騰作用相似。同樣,ICL SW處理的植株在干旱條件下表現(xiàn)出的午間蒸騰速率(圖3E)。在充分灌溉條件下,與對(duì)照相比,生物刺激劑處理的植株測(cè)得的蒸騰速率(圖3E)和干枝生物量(圖4B)較高,表明與鮮重相關(guān)的水分利用效率有所提高。然而,這種改善(增加~I(xiàn)CL SW治療和~I(xiàn)CL-NewFo1處理過的植物的14%)不顯著(圖4E)。

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圖5.生物刺激劑對(duì)植物恢復(fù)力的影響

估測(cè)植物從干旱脅迫中恢復(fù)需要考慮兩個(gè)特征:(i)全株蒸騰恢復(fù):恢復(fù)灌溉后日蒸騰增加的速率與干旱期間日蒸騰減少的速率相比較。圖5A顯示了這兩種速率的數(shù)據(jù)點(diǎn),表明與對(duì)照和ICL-NewFo1處理的植株相比,ICL-SW降低了植株的恢復(fù)力(圖5B)(ii)夜間水分再吸收(即恢復(fù)白天損失的水),分別如圖5C-F所示。與對(duì)照組相比,生物刺激劑處理的植株在預(yù)處理期間的夜間水分重吸收顯著更高,用ICL-NewFo1處理植株的夜間水分重吸收值最高(圖5C)。干旱脅迫降低了三組恢復(fù)期夜間水分的再吸收能力。然而,與對(duì)照組相比,生物刺激劑提高了恢復(fù)期間的再吸收能力,ICL-NewFo1處理的植株再吸收能力最高(圖5E)。當(dāng)夜間水分重吸收標(biāo)準(zhǔn)化為植物重量時(shí),觀察到類似的趨勢(shì),與對(duì)照相比,ICL-NewFo1處理過植株的重吸收能力明顯是最高的(圖5D,F(xiàn))。